一、范围
本标准适用于小麦茎基腐病的测报。

二、术语和定义
2.1 茎基腐病：小麦茎部基部发生的一种病害，主要由真菌引起。
2.2 样品：指采自小麦茎部基部的样品。
2.3 检测：指对样品进行小麦茎基腐病的检测。
2.4 阳性：指检测结果为小麦茎基腐病阳性。
2.5 阴性：指检测结果为小麦茎基腐病阴性。

三、技术要求
3.1 采样
3.1.1 采样时间：小麦茎部基部发病期，一般在小麦拔节期后。
3.1.2 采样方法：采用无菌器具采集样品，避免污染。
3.1.3 采样量：每个样品应采集3-5个小麦茎部基部。
3.1.4 样品保存：采集后应立即送检，如需保存，应在4℃下保存，不得超过24小时。

3.2 检测方法
3.2.1 样品处理：将采集的样品去皮，切成小段，用无菌水洗净，晾干备用。
3.2.2 PCR扩增：采用PCR扩增技术进行检测，扩增条件为：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环，72℃延伸10min。
3.2.3 结果判定：扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳，阳性样品出现特异性条带，阴性样品无条带。

四、结果判定
4.1 阳性：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，出现特异性条带。
4.2 阴性：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，无特异性条带。

五、质量控制
5.1 采样质量控制：采样前应对采样器具进行灭菌处理，避免污染。
5.2 PCR扩增质量控制：每批次检测应设置阳性对照和阴性对照，确保扩增反应的准确性和可靠性。

相关标准
GB/T 23538-2009 小麦茎基腐病检疫鉴定方法
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