NY/T 4199-2022
甜瓜品种真实性鉴定 SSR分子标记法
发布时间:2022-11-11 实施时间:2023-03-01


甜瓜是一种重要的经济作物,其品种繁多,但由于品种间的相似性较高,品种真实性鉴定一直是甜瓜种质资源管理和品种保护的重要问题。SSR分子标记法是一种基于PCR扩增和电泳分析的分子生物学技术,具有高度的特异性和重复性,已经成为甜瓜品种真实性鉴定的重要手段。

1. 样品采集
样品采集应选择健康、生长良好的甜瓜植株,采集新鲜叶片或嫩茎,避免受到病虫害的影响。采集的样品应立即放入干燥的密闭袋中,标注好采集时间、地点和品种等信息,送至实验室进行处理。

2. DNA提取
DNA提取应采用适当的方法,如CTAB法、酚/氯仿法等。提取的DNA应具有高纯度、高质量和高浓度,以保证后续PCR扩增的成功率。

3. PCR扩增
PCR扩增应选择适当的引物对,根据引物序列设计引物,PCR反应体系应包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶和缓冲液等。PCR反应条件应根据引物序列和模板DNA的特性进行优化,以保证PCR扩增的特异性和重复性。

4. 电泳分析
PCR扩增产物应进行电泳分析,分析条件应根据PCR扩增产物的大小和数量进行优化。电泳分析结果应进行图像记录和分析,以确定甜瓜品种的真实性。

相关标准
GB/T 20481-2006 甜瓜品种分类和命名
GB/T 20482-2006 甜瓜种子品质检验方法
GB/T 20483-2006 甜瓜种子生活力检验方法
GB/T 20484-2006 甜瓜种子萌发力检验方法
GB/T 20485-2006 甜瓜种子杂质检验方法