一、范围
本标准规定了羊肚菌属植物品种特异性、一致性和稳定性测试的方法和要求。

本标准适用于羊肚菌属植物品种特异性、一致性和稳定性测试。

二、术语和定义
本标准中使用的术语和定义与GB/T 8300.1-2006《生物技术术语 第1部分：分子生物学》相一致。

三、测试方法
3.1 特异性测试
3.1.1 PCR扩增
3.1.1.1 根据羊肚菌属植物品种的已知序列设计引物，进行PCR扩增。
3.1.1.2 选择适当的PCR条件，进行PCR扩增。
3.1.1.3 对PCR扩增产物进行电泳分析，判断扩增产物的特异性。

3.1.2 DNA测序
3.1.2.1 对PCR扩增产物进行DNA测序。
3.1.2.2 将测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列进行比对，判断扩增产物的特异性。

3.2 一致性测试
3.2.1 PCR扩增
3.2.1.1 根据羊肚菌属植物品种的已知序列设计引物，进行PCR扩增。
3.2.1.2 选择适当的PCR条件，进行PCR扩增。
3.2.1.3 对PCR扩增产物进行电泳分析，判断扩增产物的一致性。

3.2.2 DNA测序
3.2.2.1 对PCR扩增产物进行DNA测序。
3.2.2.2 将测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列进行比对，判断扩增产物的一致性。

3.3 稳定性测试
3.3.1 PCR扩增
3.3.1.1 根据羊肚菌属植物品种的已知序列设计引物，进行PCR扩增。
3.3.1.2 选择适当的PCR条件，进行PCR扩增。
3.3.1.3 对PCR扩增产物进行电泳分析，判断扩增产物的稳定性。

3.3.2 DNA测序
3.3.2.1 对PCR扩增产物进行DNA测序。
3.3.2.2 将测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列进行比对，判断扩增产物的稳定性。

四、测试要求
4.1 样品要求
4.1.1 样品应为羊肚菌属植物品种。
4.1.2 样品应为纯度高、质量好的DNA样品。

4.2 仪器设备要求
4.2.1 PCR仪
4.2.2 DNA测序仪

4.3 试剂要求
4.3.1 PCR试剂盒
4.3.2 DNA测序试剂盒

五、结果判定
5.1 特异性测试
5.1.1 PCR扩增
5.1.1.1 扩增产物为单条特异性条带，且大小符合预期。
5.1.2 DNA测序
5.1.2.1 测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列完全匹配。

5.2 一致性测试
5.2.1 PCR扩增
5.2.1.1 扩增产物为单条一致性条带，且大小符合预期。
5.2.2 DNA测序
5.2.2.1 测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列完全匹配。

5.3 稳定性测试
5.3.1 PCR扩增
5.3.1.1 扩增产物为单条稳定性条带，且大小符合预期。
5.3.2 DNA测序
5.3.2.1 测序结果与已知的羊肚菌属植物品种序列完全匹配。

相关标准
GB/T 8300.1-2006 生物技术术语 第1部分：分子生物学
NY/T 4222-2022 植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南 菌类属
NY/T 4223-2022 植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南 真菌属
NY/T 4224-2022 植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南 细菌属
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