1.范围
本标准适用于烟草及烟草制品中总蛋白质含量的测定。

2.引用标准
GB/T 601-2002 烟草制品取样方法
GB/T 602-2002 烟草制品水分测定法
GB/T 603-2002 烟草制品灰分测定法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
YC/T 165-2003 烟草及烟草制品氨含量的测定

3.原理
样品经酸水解后，蛋白质转化为氨基酸，再经比色法测定氨基酸含量，从而计算出总蛋白质含量。

4.仪器和设备
4.1 恒温水浴器
4.2 离心机
4.3pH计
4.4 比色计

5.试剂和材料
5.1 氢氧化钠(NaOH)
5.2 硫酸(H2SO4)
5.3 氯化钠(NaCl)
5.4 氨基酸标准溶液
5.5 硼酸-硫酸试剂
5.6 氨基酸比色液

6.样品的制备
按GB/T 601-2002的方法取样，将样品粉碎并筛过40目筛，取适量样品称重。

7.操作步骤
7.1 样品的水解
将样品加入酸水解液中，在恒温水浴器中加热水浴，水解2小时，冷却至室温，用氢氧化钠调节pH值至7.0-7.5。

7.2 氨基酸的测定
将水解液离心，取上清液，加入硼酸-硫酸试剂，混匀后加入氨基酸比色液，比色计测定吸光度。

7.3 计算
按下式计算总蛋白质含量：
总蛋白质含量（%）=（C×V×D）/m
其中，C为氨基酸标准溶液的浓度（mg/mL），V为氨基酸标准溶液的用量（mL），D为稀释倍数，m为样品质量（g）。

8.结果的表示
结果保留两位小数，单位为百分数。

9.精密度和准确度
本方法的精密度和准确度参见YC/T 165-2003。

10.质量控制
10.1 重复测定样品，计算相对标准偏差，不得大于2%。
10.2 加入已知量的氨基酸标准溶液，进行回收率试验，回收率应在95%~105%之间。

相关标准
GB/T 601-2002 烟草制品取样方法
GB/T 602-2002 烟草制品水分测定法
GB/T 603-2002 烟草制品灰分测定法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
YC/T 165-2003 烟草及烟草制品氨含量的测定