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烟草病毒是烟草生产中的一种重要病毒，对烟草的生长和产量造成了很大的影响。因此，对烟草病毒的测定显得尤为重要。本标准采用逆转录-聚合酶链反应法进行烟草病毒的测定。

1. 逆转录-聚合酶链反应法的原理
逆转录-聚合酶链反应法是一种敏感、特异、快速的核酸检测技术。该方法利用逆转录酶将RNA转录成cDNA，然后利用聚合酶链反应扩增cDNA，最终通过凝胶电泳等方法检测扩增产物。该方法具有高灵敏度、高特异性、高效率、快速、简便等优点。

2. 逆转录-聚合酶链反应法的操作步骤
（1）样品处理：将待测样品进行处理，提取其中的RNA。
（2）逆转录：将RNA转录成cDNA。
（3）聚合酶链反应：将cDNA进行扩增。
（4）检测：通过凝胶电泳等方法检测扩增产物。

3. 逆转录-聚合酶链反应法的结果判定
通过凝胶电泳等方法检测扩增产物，根据扩增产物的大小和数量判断样品中是否存在烟草病毒。

4. 逆转录-聚合酶链反应法的质量控制
（1）实验室环境的控制：保持实验室的清洁、干燥、无菌。
（2）试剂的控制：使用高质量的试剂，避免试剂的污染。
（3）实验操作的控制：操作人员应具备一定的实验技能，操作过程中应注意无菌操作。

相关标准：
GB/T 5009.33-2017 食品中病毒的检验
GB/T 5009.34-2017 食品中病毒的检验 逆转录-聚合酶链反应法
GB/T 5009.35-2017 食品中病毒的检验 聚合酶链反应法
GB/T 5009.36-2017 食品中病毒的检验 聚合酶链反应-荧光定量PCR法
GB/T 5009.37-2017 食品中病毒的检验 聚合酶链反应-荧光定量PCR法