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肉类罐头是一种方便快捷的食品，但是其中的肉类成分是否真实，一直是消费者关注的问题。为了保障消费者的权益，需要对肉类罐头中的成分进行检测。本标准提供了一种PCR法检测肉类罐头中牛、羊、猪、鸡、鸭源性成分的方法。

1.范围
本标准适用于肉类罐头中牛、羊、猪、鸡、鸭源性成分的检测。

2.试验方法
2.1 样品制备
将肉类罐头样品取出，去除汁液，将肉类成分切成小块，放入离心管中，加入适量的PBS缓冲液，混匀后离心，去除上清液，重复上述步骤，直至样品中的肉类成分完全分离。

2.2 DNA提取
将样品中的DNA提取出来，使用PCR扩增。

2.3 PCR扩增
使用特异性引物扩增样品中的牛、羊、猪、鸡、鸭DNA片段，PCR反应体系和条件见表1。

表1 PCR反应体系和条件

反应体系 体积/μL

2×PCR Master Mix 12.5
特异性引物（10μmol/L） 1.0
DNA模板 2.0
ddH2O 9.5
总体积 25.0

PCR反应条件：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环，72℃延伸10min，4℃保持。

2.4 PCR产物检测
将PCR产物进行凝胶电泳，观察PCR产物的条带，根据条带的大小和数量，判断样品中是否存在牛、羊、猪、鸡、鸭DNA。

3.结果判定
3.1 PCR产物检测结果
如果PCR产物中存在牛、羊、猪、鸡、鸭DNA，那么样品中存在相应的肉类成分。

3.2 阳性对照
使用已知的牛、羊、猪、鸡、鸭DNA作为阳性对照，检测PCR反应是否正常。

4.质量控制
4.1 实验室环境
实验室应该保持干净整洁，避免污染。

4.2 试剂质量控制
使用高质量的试剂，避免试剂污染。

4.3 实验人员
实验人员应该具有PCR技术操作经验，避免操作失误。

相关标准：
GB/T 5009.5-2016 食品中蛋白质的测定
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