一、范围
本标准规定了发酵液中L-乳酸的测定方法，采用酶电极法进行测定。适用于发酵液中L-乳酸的测定。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价方法
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 13078-1991 电化学分析方法术语
GB/T 14633-2011 食品添加剂 酸味剂 乳酸
GB/T 17889-2015 食品添加剂 乳酸及其钠、钾、钙盐

三、原理
将发酵液样品加入含有L-乳酸脱氢酶和辅酶的缓冲液中，使L-乳酸脱氢酶催化L-乳酸氧化为丙酮酸和H2O2，H2O2在电极表面催化还原为H2O，同时产生电子，电子流经电极，产生电流信号，根据电流信号计算出L-乳酸的浓度。

四、仪器和设备
1. pH计
2. 电位计
3. 恒温水浴器
4. 电极（包括参比电极和工作电极）
5. 称量器具
6. 离心机

五、试剂和材料
1. L-乳酸脱氢酶
2. 辅酶
3. 缓冲液
4. 标准品
5. 发酵液样品

六、操作步骤
1. 标准曲线的制备
（1）取一定量的L-乳酸标准品，加入缓冲液中，制备出一系列不同浓度的标准品。
（2）将标准品加入含有L-乳酸脱氢酶和辅酶的缓冲液中，使L-乳酸氧化为丙酮酸和H2O2，H2O2在电极表面催化还原为H2O，同时产生电子，电子流经电极，产生电流信号，根据电流信号计算出L-乳酸的浓度。
（3）根据所得数据绘制标准曲线。

2. 样品的测定
（1）取一定量的发酵液样品，加入缓冲液中，使L-乳酸氧化为丙酮酸和H2O2，H2O2在电极表面催化还原为H2O，同时产生电子，电子流经电极，产生电流信号，根据电流信号计算出L-乳酸的浓度。
（2）根据标准曲线计算出样品中L-乳酸的浓度。

七、结果的计算与表达
样品中L-乳酸的浓度，按照GB/T 8170-2008的规定进行四舍五入，保留有效数字。

八、精密度和准确度
本方法的精密度和准确度，参照GB/T 6682-2008的规定进行评价。

九、质量控制
本方法的质量控制，参照GB/T 6682-2008的规定进行实施。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价方法
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 13078-1991 电化学分析方法术语
GB/T 14633-2011 食品添加剂 酸味剂 乳酸
GB/T 17889-2015 食品添加剂 乳酸及其钠、钾、钙盐