QB/T 5713-2022
发酵液中L-谷氨酸的测定 酶电极法
发布时间:2022-04-08 实施时间:2022-10-01


L-谷氨酸是一种重要的氨基酸,广泛应用于食品、医药、化工等领域。发酵液中L-谷氨酸的测定是发酵工艺控制和产品质量控制的重要指标之一。本标准采用酶电极法进行测定,具有快速、准确、灵敏度高等优点。

1. 原理
将发酵液样品加入含有L-谷氨酸酶的缓冲液中,L-谷氨酸酶催化L-谷氨酸与α-酮戊二酸反应生成谷氨酰丙酮酸和NH4+,同时释放出H+,使溶液pH下降。酶电极检测到H+的浓度变化,通过计算pH值的变化量,即可计算出样品中L-谷氨酸的含量。

2. 仪器和试剂
2.1 电极:pH计和酶电极。
2.2 试剂:L-谷氨酸酶、α-酮戊二酸、缓冲液等。

3. 样品处理
将发酵液样品过滤,去除杂质,然后进行稀释,使其L-谷氨酸浓度在检测范围内。

4. 操作步骤
4.1 取适量发酵液样品,加入含有L-谷氨酸酶的缓冲液中,混匀。
4.2 将混合液倒入电极池中,记录初始pH值。
4.3 在恒温条件下,加入适量的α-酮戊二酸,开始反应。
4.4 记录反应后的pH值,计算pH值的变化量。
4.5 根据标准曲线计算出样品中L-谷氨酸的含量。

5. 结果计算
样品中L-谷氨酸的含量,按照标准曲线计算。

6. 精密度和准确度
6.1 精密度:同一样品进行重复测定,相对标准偏差不大于5%。
6.2 准确度:加入已知浓度的L-谷氨酸标准品,进行回收率试验,回收率在95%~105%之间。

相关标准
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