衣康酸是一种广泛存在于自然界中的有机酸，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性。因此，衣康酸在医药、食品、化妆品等领域有着广泛的应用。发酵液中衣康酸的测定是衡量发酵液中衣康酸含量的重要方法之一。

本标准采用高效液相色谱法测定发酵液中衣康酸的含量。具体操作步骤如下：

1. 仪器设备
本方法所需的仪器设备包括高效液相色谱仪、色谱柱、移液器、瓶塞、量筒、瓶口滤器等。

2. 样品制备
将发酵液样品取适量，加入等体积的甲醇，振荡混合，离心沉淀，取上清液过滤，即得待测样品。

3. 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）
流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（30:70）
流速：1.0 mL/min
检测波长：254 nm
进样量：10 μL

4. 标准曲线的绘制
取不同浓度的衣康酸标准品，按照上述方法进行测定，绘制衣康酸浓度与峰面积的标准曲线。

5. 样品测定
取待测样品，按照上述方法进行测定，根据标准曲线计算出衣康酸的含量。

6. 结果计算
样品中衣康酸的含量，按照下式计算：

C=Cs×Vs/Vm×D

其中，C为样品中衣康酸的含量（mg/mL）；Cs为标准品中衣康酸的浓度（mg/mL）；Vs为标准品的体积（mL）；Vm为待测样品的体积（mL）；D为稀释倍数。

相关标准
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