SC/T 7016.10-2012
鱼类细胞系 第10部分:狗鱼性腺细胞系(PG)
发布时间:2012-12-07 实施时间:2013-03-01


鱼类细胞系是研究鱼类生物学、生态学、毒理学等领域的重要工具。狗鱼(Carassius auratus)是一种常见的淡水鱼类,广泛分布于我国各地水域。狗鱼性腺细胞系(PG)是一种来源于狗鱼卵巢的细胞系,具有较高的增殖能力和稳定性,是研究鱼类生殖生物学、生殖毒理学等领域的重要工具。

本标准规定了狗鱼性腺细胞系(PG)的建立、维持和应用要求,以及PG的鉴定和检测方法。具体内容如下:

1. 建立和维持要求
(1)PG的来源应为健康的狗鱼卵巢组织,采集后应立即进行细胞分离和培养。
(2)PG的培养基应为含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,温度为28℃,CO2浓度为5%。
(3)PG的传代应在80%~90%的密度下进行,每7~10天传1次代。
(4)PG的冻存应在培养后期进行,冻存液应为含有10% DMSO的培养基。

2. 应用要求
(1)PG应在无菌条件下进行培养和应用。
(2)PG应在细胞增殖期进行实验,一般为传代后2~3天。
(3)PG应在同一批次的细胞中进行比较实验,以减少实验误差。

3. 鉴定和检测方法
(1)形态学鉴定:PG细胞呈椭圆形或多角形,细胞贴壁生长,细胞核呈圆形或椭圆形,染色质均匀分布。
(2)免疫细胞化学鉴定:使用PG特异性抗体进行免疫细胞化学染色,检测PG的特异性标记物。
(3)细胞生长曲线检测:使用MTT法或CCK-8法检测PG的细胞增殖情况。
(4)染色体分析:使用Giemsa染色法或FISH技术对PG进行染色体分析,检测PG的染色体数目和结构。

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