鱼类细胞系是研究鱼类生物学、病理学、毒理学等领域的重要工具。草鱼肾细胞系(CIK)是一种常用的鱼类细胞系,广泛应用于鱼类病毒学、免疫学、毒理学等领域。本标准旨在规范草鱼肾细胞系的建立、鉴定、保存、培养和生长特性等方面的要求,以保证其质量和稳定性。
1. 建立
草鱼肾细胞系的建立应采用草鱼肾脏组织为原料,经过消化、筛选、培养等步骤得到。建立过程中应注意细胞的纯化和鉴定,确保细胞系的来源和纯度。
2. 鉴定
草鱼肾细胞系的鉴定应包括形态学、生长特性、细胞学特征、遗传学特征等方面的检测。其中,形态学检测应包括细胞形态、细胞大小、细胞核形态等方面的观察;生长特性检测应包括细胞生长速率、细胞密度等方面的测定;细胞学特征检测应包括染色体数目、核型等方面的分析;遗传学特征检测应包括同工酶分析、DNA指纹图谱等方面的检测。
3. 保存
草鱼肾细胞系的保存应采用液氮冷冻法或低温保存法。液氮冷冻法应在细胞生长活跃期进行,将细胞悬液与冷冻保护剂混合后分装至液氮罐中保存。低温保存法应在细胞生长活跃期进行,将细胞悬液与低温保存剂混合后保存于-80℃的冰箱中。
4. 培养
草鱼肾细胞系的培养应采用无菌技术,培养基应选用适宜的培养基,如DMEM/F12培养基等。培养条件应控制在37℃、5% CO2、相对湿度95%左右的条件下进行。培养过程中应注意细胞的生长状态和培养液的清洁卫生。
5. 生长特性
草鱼肾细胞系的生长特性应包括细胞生长曲线、细胞增殖能力、细胞周期等方面的测定。其中,细胞生长曲线应通过细胞计数法或MTT法等方法测定;细胞增殖能力应通过克隆形成实验等方法测定;细胞周期应通过细胞周期分析仪等设备测定。
相关标准
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