鱼类细胞系是研究鱼类生物学、疾病防控和水产养殖等领域的重要工具。斑点叉尾鮰卵巢细胞系(CCO)是一种新近研制的鱼类细胞系,具有较好的生长特性和稳定性,可用于病原微生物的检测、疫苗研制、毒理学研究等方面。SC/T 7016.8-2012标准规定了CCO的来源、形态学特征、生长特性、细胞培养条件、细胞冻存和复苏等方面的要求,为该细胞系的应用提供了技术支持和保障。
1.来源
CCO细胞系来源于斑点叉尾鮰(Oryzias latipes)的卵巢组织,经过多代传代培养而得。该细胞系的鉴定和命名由中国科学院水生生物研究所细胞生物学实验室完成。
2.形态学特征
CCO细胞呈椭圆形或多角形,细胞贴壁生长,细胞核圆形或椭圆形,染色质均匀分布,胞质内含有丰富的细胞器。细胞形态稳定,无明显变异。
3.生长特性
CCO细胞在培养基中生长迅速,生长曲线呈S型,细胞密度可达到1×10^6/ml以上。细胞生长温度为25-28℃,pH值为7.0-7.4,CO2浓度为5%。
4.细胞培养条件
CCO细胞的培养基为L-15培养基,添加10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素。细胞密度达到80%时需进行传代,传代比为1:2-1:3。细胞冻存前需添加10% DMSO,冻存温度为-80℃。
5.细胞冻存和复苏
CCO细胞冻存前需进行细胞数计数,细胞密度应为1×10^6/ml以上。添加10% DMSO后,将细胞悬液分装于冻存管中,放置于-80℃冷冻。复苏时,将冻存管放置于37℃水浴中,待细胞完全解冻后,将细胞悬液加入预先加热的培养基中,离心收集细胞,进行细胞培养。
相关标准
SC/T 7016.1-2012 鱼类细胞系 第1部分:通用要求
SC/T 7016.2-2012 鱼类细胞系 第2部分:鲤鱼卵巢细胞系(CCO)
SC/T 7016.3-2012 鱼类细胞系 第3部分:鲫鱼卵巢细胞系(CCO)
SC/T 7016.4-2012 鱼类细胞系 第4部分:草鱼卵巢细胞系(CCO)
SC/T 7016.5-2012 鱼类细胞系 第5部分:罗非鱼卵巢细胞系(CCO)