白斑综合征病毒(wssv)是一种对虾养殖业造成严重危害的病毒，能够引起对虾体内的白斑病变，导致对虾死亡率高达100%。因此，对于对虾养殖业来说，及时、准确地检测出白斑综合征病毒非常重要。本标准提供了一种可靠的检测方法，即白斑综合征病毒(wssv)环介导等温扩增检测方法。

1. 范围
本标准适用于对虾样品中白斑综合征病毒(wssv)的检测。

2. 原理
本方法利用等温扩增技术，通过特异性引物和酶的作用，在等温条件下扩增目标序列，最终通过凝胶电泳检测扩增产物。

3. 试剂和材料
3.1 试剂
（1）等温扩增试剂盒
（2）DNA提取试剂盒
（3）琼脂糖
（4）TAE缓冲液
（5）DNA分子量标准品

3.2 材料
（1）PCR管
（2）PCR板
（3）电泳仪
（4）紫外线照射器
（5）移液器
（6）离心机

4. 操作步骤
4.1 样品处理
（1）取对虾样品，去头、壳、肠等杂质，取肌肉组织，切成小块。
（2）加入DNA提取试剂盒，按照说明书提取DNA。
（3）将提取的DNA用无菌水稀释至100ng/μL。

4.2 等温扩增
（1）将等温扩增试剂盒中的试剂按照说明书配置。
（2）将扩增试剂与DNA模板混合，混匀后加入PCR管中。
（3）将PCR管放入等温扩增仪中，进行等温扩增反应。

4.3 凝胶电泳
（1）取1%琼脂糖，加入TAE缓冲液中，煮沸溶解。
（2）将扩增产物与DNA分子量标准品混合，加入琼脂糖-TAE缓冲液中，混匀后倒入电泳板中。
（3）将电泳板放入电泳仪中，进行电泳分离。
（4）取出电泳板，用紫外线照射器观察扩增产物。

5. 结果判定
（1）扩增产物为一条明显的条带，大小为约600bp。
（2）未检测到扩增产物时，样品为阴性。

6. 结果报告
（1）样品编号
（2）扩增结果
（3）检测人员
（4）检测日期

相关标准
GB/T 22470-2008 对虾白斑综合征病毒检测方法
GB/T 22471-2008 对虾白斑综合征病毒检测试剂盒
GB/T 22472-2008 对虾白斑综合征病毒检测仪器
GB/T 22473-2008 对虾白斑综合征病毒检测质量控制
GB/T 22474-2008 对虾白斑综合征病毒检测结果判定