对虾偷死野田村病毒(CMNV)是一种对虾病毒性疾病，主要感染对虾，会导致对虾死亡。为了保障对虾及其产品的质量安全，需要对其进行CMNV的检测。本标准就是为了规范对虾偷死野田村病毒的检测方法。

1. 范围
本标准适用于对虾及其产品中CMNV的检测。

2. 样品处理
2.1 对虾样品的处理
将对虾样品去壳、去头、去内脏，取肌肉组织进行检测。
2.2 对虾产品的处理
将对虾产品样品取适量，加入PBS缓冲液，混匀后进行检测。

3. 核酸提取
3.1 对虾样品的核酸提取
将对虾肌肉组织样品加入核酸提取试剂，按照试剂盒说明书进行核酸提取。
3.2 对虾产品的核酸提取
将对虾产品样品加入核酸提取试剂，按照试剂盒说明书进行核酸提取。

4. PCR扩增
按照试剂盒说明书进行PCR扩增，扩增条件如下：
4.1 反应体系
反应体系总体积为25μL，包括PCR反应缓冲液、酶、引物、模板DNA等。
4.2 PCR程序
PCR程序如下：
预变性：95℃，5min
变性：95℃，30s
退火：55℃，30s
延伸：72℃，30s
循环30次
最终延伸：72℃，10min
4.3 PCR产物检测
将PCR产物进行凝胶电泳检测，检测结果为阳性时，表示样品中存在CMNV。

5. 结果判定
5.1 阳性判定
PCR产物经凝胶电泳检测，出现目标条带，且条带大小符合预期，即为阳性。
5.2 阴性判定
PCR产物经凝胶电泳检测，未出现目标条带，即为阴性。

相关标准
GB/T 4789.33-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 5009.3-2016 食品中灰分的测定
GB/T 5009.4-2017 食品中粗蛋白的测定
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