咖啡美洲叶斑病菌是咖啡树上的一种真菌，是咖啡叶斑病的主要病原体。为了保障咖啡产业的健康发展，需要对咖啡美洲叶斑病菌进行鉴定。本标准提供了一套完整的鉴定方法。

1. 范围
本标准规定了咖啡美洲叶斑病菌的鉴定方法，适用于咖啡美洲叶斑病菌的鉴定。

2. 引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价标准
GB/T 191-2008 包装、装运、储存标志和说明文件的编制
GB/T 8170-2008 产品标准的编写与表达
GB/T 10357.1-2013 环境试验程序与方法 通则
GB/T 10357.2-2013 环境试验程序与方法 温度试验

3. 术语和定义
本标准中使用的术语和定义与GB/T 6682-2008中的术语和定义相同。

4. 样品采集和处理
4.1 样品采集
从咖啡树上采集叶片样品，应选择病斑较明显的叶片，避免选择已经脱落的叶片。采集的叶片应放入密闭袋中，避免受到外界污染。

4.2 样品处理
将采集的叶片样品放入无菌研钵中，用无菌剪刀将叶片切成小块，去除叶柄和叶脉。将叶片块放入含有抗生素的无菌生理盐水中，摇晃均匀，使细菌和真菌得到抑制。

5. 分离和培养
5.1 分离
将处理后的叶片样品均匀涂抹在含有抗生素的琼脂平板上，用无菌棉签将叶片样品均匀涂抹开。将琼脂平板倒置放入恒温培养箱中，温度为25℃，光照强度为2000lx，相对湿度为80%。培养3-5天后，可见到菌落生长。

5.2 鉴定
将分离出的菌落进行形态学鉴定和生理生化鉴定，确定其是否为咖啡美洲叶斑病菌。

6. 结果判定
6.1 形态学鉴定
咖啡美洲叶斑病菌的菌落呈灰色或灰绿色，表面光滑，边缘整齐，直径为2-5mm。在显微镜下观察，可见到菌丝呈灰色或灰绿色，有分枝，长约5-10μm。

6.2 生理生化鉴定
咖啡美洲叶斑病菌在琼脂平板上生长缓慢，需要3-5天才能形成菌落。在培养基中添加葡萄糖、酵母提取物等营养物质，可促进其生长。咖啡美洲叶斑病菌在培养基中产生黑色素，可用此特征进行鉴定。

7. 报告内容
7.1 鉴定结果
报告应包括样品来源、鉴定方法、鉴定结果等内容。

7.2 鉴定结论
根据鉴定结果，判断样品中是否存在咖啡美洲叶斑病菌。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价标准
GB/T 191-2008 包装、装运、储存标志和说明文件的编制
GB/T 8170-2008 产品标准的编写与表达
GB/T 10357.1-2013 环境试验程序与方法 通则
GB/T 10357.2-2013 环境试验程序与方法 温度试验