黑森瘿蚊是一种传播病毒的蚊子，被列为我国重点检疫对象。为了防止黑森瘿蚊的传播，需要对其进行检疫鉴定。本标准规定了黑森瘿蚊的检疫鉴定方法，具体步骤如下：

1. 样品采集
样品可以是蚊子、幼虫、卵或其它含有黑森瘿蚊DNA的材料。采集样品时应注意避免污染和损伤，采集后应立即送至实验室进行处理。

2. 样品处理
将样品放入离心管中，加入适量的PBS缓冲液，离心10分钟，去掉上清液。加入适量的蛋白酶K，室温下消化1小时。加入等体积的酚/氯仿混合液，振荡混合，离心10分钟，取上清液。

3. PCR扩增
将上清液加入PCR反应管中，加入PCR扩增试剂盒中的反应液，进行PCR扩增。PCR反应条件为：95℃预变性5分钟，95℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35个循环。扩增产物进行凝胶电泳，观察是否有黑森瘿蚊的特异性条带。

4. 显微镜检查
将PCR扩增产物滴于载玻片上，加入适量的甘油，覆盖玻片，用显微镜观察是否有黑森瘿蚊的形态特征。

本标准的实施可以有效地检测黑森瘿蚊，保障国家的生物安全。

相关标准
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