一、范围
本标准适用于进出口粮谷中呕吐毒素的检验。

二、仪器和设备
1. 液相色谱仪：具有紫外检测器和荧光检测器。
2. 色谱柱：C18反相色谱柱，长度250mm，内径4.6mm，颗粒度5μm。
3. 称量仪：精度为0.1mg。
4. 超声波清洗仪：功率为100W，频率为40kHz。
5. 离心机：最高转速为12000r/min。

三、试剂和材料
1. 甲醇：色谱纯。
2. 水：去离子水或超纯水。
3. 乙腈：色谱纯。
4. 磷酸二氢钾：分析纯。
5. 磷酸氢二钠：分析纯。
6. 氯仿：色谱纯。
7. 硫酸：分析纯。
8. 氢氧化钠：分析纯。
9. 氯化钠：分析纯。
10. 呕吐毒素标准品：供应商为国家食品药品监督管理局指定的生产厂家。

四、样品的制备
1. 取样：按照GB/T 5009.3-2016《食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法》的规定进行取样。
2. 样品的制备：按照GB/T 5009.3-2016的规定进行制备。

五、操作步骤
1. 样品的提取
（1）取10g样品，加入50mL甲醇水溶液（70:30），超声波清洗10min。
（2）用离心机离心10min，取上清液过滤。
（3）取过滤液10mL，加入10μL呕吐毒素标准品，制成浓度为1μg/mL的混合液。
（4）用C18反相色谱柱进行分离，流动相为甲醇-水（70:30），流速为1.0mL/min，检测波长为232nm。
（5）用荧光检测器检测，激发波长为274nm，发射波长为440nm。

2. 样品的测定
（1）取10g样品，加入50mL甲醇水溶液（70:30），超声波清洗10min。
（2）用离心机离心10min，取上清液过滤。
（3）取过滤液10mL，加入10μL呕吐毒素标准品，制成浓度为1μg/mL的混合液。
（4）用C18反相色谱柱进行分离，流动相为乙腈-水（60:40），流速为1.0mL/min，检测波长为232nm。
（5）用荧光检测器检测，激发波长为274nm，发射波长为440nm。

六、结果的计算
样品中呕吐毒素的含量，按照GB/T 5009.3-2016的规定进行计算。

七、质量控制
1. 样品的制备和检测过程中，应设置空白对照组和质控组。
2. 质控组的制备和检测，按照GB/T 5009.3-2016的规定进行。

八、报告格式
样品中呕吐毒素的含量，按照GB/T 5009.3-2016的规定进行报告。

相关标准
GB/T 5009.3-2016 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.22-2016 食品中真菌毒素的测定 液相色谱法
GB/T 18979-2003 玉米中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 液相色谱法
GB/T 18980-2003 小麦中赤霉烯酮的测定 液相色谱法
GB/T 18981-2003 玉米中赤霉烯酮的测定 液相色谱法