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转基因技术是指将外源基因导入到目标生物体内,使其表现出新的性状或增强原有性状的一种技术。转基因技术的应用范围非常广泛,其中包括食品领域。转基因食品是指通过转基因技术获得的食品,其成分中含有转基因植物成分。为了保障消费者的健康和权益,需要对食品中的转基因植物成分进行检测。本标准规定了食品中转基因植物成分定性PCR检测方法。
1.范围
本标准适用于食品中转基因植物成分的定性PCR检测。
2.检测原理
本标准采用PCR技术对食品中的转基因植物成分进行检测。PCR技术是一种体外扩增DNA的技术,通过PCR扩增可以将微量的DNA扩增到足够的数量,从而进行检测。本标准采用的PCR方法是基于转基因植物特异序列的PCR方法,通过检测转基因植物特异序列的存在与否来判断食品中是否含有转基因植物成分。
3.试剂和仪器
本标准所需试剂和仪器如下:
(1)PCR试剂盒:包括PCR反应缓冲液、酶、dNTPs、引物等;
(2)DNA提取试剂盒:包括细胞裂解液、蛋白酶K、洗涤缓冲液等;
(3)PCR仪:用于PCR反应;
(4)电泳仪:用于PCR产物的电泳分析。
4.样品处理
样品处理包括样品的采集、样品的制备和DNA的提取。样品的采集应当遵循相应的规范,样品的制备应当避免样品的污染。DNA的提取应当采用合适的方法,确保提取的DNA质量和纯度。
5.PCR反应
PCR反应应当按照PCR试剂盒的说明进行,PCR反应条件如下:
(1)预变性:95℃,5min;
(2)变性:95℃,30s;
(3)退火:根据引物的Tm值确定;
(4)延伸:72℃,30s;
(5)终止延伸:72℃,10min。
6.电泳分析
PCR产物应当进行电泳分析,电泳条件如下:
(1)电泳缓冲液:TBE缓冲液;
(2)电泳电压:100V;
(3)电泳时间:30min;
(4)电泳结果:根据PCR产物的大小和数量判断样品中是否含有转基因植物成分。
相关标准:
GB/T 20884-2007 食品中转基因成分定量PCR检测方法
GB/T 20885-2007 食品中转基因成分检测方法
GB/T 20886-2007 食品中转基因成分定性检测方法
GB/T 28046-2011 食品中转基因成分检测方法
GB/T 28047-2011 食品中转基因成分定性检测方法