SN/T 2975-2011
鱼华支睾吸虫囊蚴鉴定方法
发布时间:2011-09-09 实施时间:2012-04-01
鱼华支睾吸虫囊蚴是一种寄生虫,常寄生于淡水鱼类的肌肉组织中,对人体健康有一定的危害。因此,对于鱼华支睾吸虫囊蚴的检测和鉴定显得尤为重要。
本标准规定了两种鉴定方法:显微镜检测和PCR技术检测。
显微镜检测方法:
1. 取样品,将其切成小块,加入生理盐水中,用力搅拌,使其充分分散。
2. 取适量样品,加入10%甲醛固定液中,固定30分钟。
3. 取适量固定液,加入甲醇中,使其脱水。
4. 取适量脱水液,加入苯胺中,使其透明。
5. 取适量透明液,加入苏木精-伊红染色液中,染色10分钟。
6. 取适量染色液,加入苏木精-伊红去色液中,去色5分钟。
7. 取适量去色液,加入甲醇中,使其脱水。
8. 取适量脱水液,加入苯胺中,使其透明。
9. 取适量透明液,加入封片剂中,制成玻璃封片。
10. 在显微镜下观察,鱼华支睾吸虫囊蚴呈椭圆形,大小约为20-30μm,有一定的透明度。
PCR技术检测方法:
1. 取样品,将其切成小块,加入生理盐水中,用力搅拌,使其充分分散。
2. 取适量样品,加入DNA提取试剂中,提取DNA。
3. 取适量DNA,加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。
4. 取适量PCR产物,进行凝胶电泳,观察PCR产物条带。
5. 鱼华支睾吸虫囊蚴的PCR产物条带大小约为200bp。
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