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国境口岸是国家的重要门户，为了保障国家的口岸卫生安全，需要对进出口的水样、食品样品进行检测。霍乱弧菌是一种能引起霍乱的病原菌，其在水样、食品样品中的检测对于保障口岸卫生安全至关重要。本标准旨在规定国境口岸霍乱弧菌的荧光PCR检测方法，以提高检测效率和准确性。

1.范围
本标准适用于国境口岸水样、食品样品中霍乱弧菌的检测。

2.检测原理
本标准采用荧光PCR技术，通过特异性引物扩增霍乱弧菌的DNA序列，再通过荧光探针检测扩增产物是否存在，从而判断样品中是否存在霍乱弧菌。

3.试剂和仪器
3.1 试剂
（1）霍乱弧菌DNA提取试剂盒
（2）PCR试剂盒
（3）荧光探针
（4）引物
（5）蒸馏水
3.2 仪器
（1）PCR仪
（2）荧光定量PCR仪

4.样品处理
4.1 水样处理
（1）取样：取样时应避免样品受到污染，取样时应使用无菌容器。
（2）处理：将水样进行过滤或沉淀，然后进行DNA提取。
4.2 食品样品处理
（1）取样：取样时应避免样品受到污染，取样时应使用无菌容器。
（2）处理：将食品样品进行细碎，然后进行DNA提取。

5.检测步骤
5.1 DNA提取
按照霍乱弧菌DNA提取试剂盒说明书进行操作。
5.2 PCR扩增
按照PCR试剂盒说明书进行操作。
5.3 荧光PCR检测
按照荧光探针说明书进行操作。

6.结果判定
6.1 阳性判定
荧光定量PCR仪显示荧光值大于等于设定值时，判定为阳性。
6.2 阴性判定
荧光定量PCR仪显示荧光值小于设定值时，判定为阴性。

7.结果报告
7.1 阳性样品
报告样品名称、样品编号、检测日期、检测人员、检测结果等信息。
7.2 阴性样品
报告样品名称、样品编号、检测日期、检测人员、检测结果等信息。

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