SN/T 3448-2012
桃树黄化植原体检疫鉴定方法
发布时间:2012-12-12 实施时间:2013-07-01
桃树黄化病是由桃树黄化病植原体引起的一种严重的病害,对桃树的生长发育和果实品质产生严重影响。为了防止该病的传播和扩散,需要对植物材料进行检疫鉴定。本标准规定了桃树黄化病植原体检疫鉴定的PCR和ELISA方法。
1. PCR方法
1.1 试剂和仪器
PCR试剂盒、PCR仪、电泳仪等。
1.2 样品处理
将样品中的DNA提取出来,用PCR扩增。
1.3 PCR扩增
按照PCR试剂盒说明书进行PCR扩增,扩增条件为:95℃预变性5min,95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环。扩增产物进行电泳检测。
1.4 结果判定
扩增产物大小为约550bp,为阳性结果;未扩增出产物为阴性结果。
2. ELISA方法
2.1 试剂和仪器
ELISA试剂盒、微孔板、洗板机、酶标仪等。
2.2 样品处理
将样品中的蛋白质提取出来,用ELISA检测。
2.3 ELISA检测
按照ELISA试剂盒说明书进行检测,将样品加入微孔板中,加入检测试剂,进行洗板和显色反应。用酶标仪测定吸光度值。
2.4 结果判定
吸光度值大于0.2为阳性结果,小于0.2为阴性结果。
相关标准
GB/T 20481-2006 植物检疫技术术语
GB/T 20482-2006 植物检疫规程
GB/T 20483-2006 植物检疫标本采集、处理和保存规范
GB/T 20484-2006 植物检疫田间检查规范
GB/T 20485-2006 植物检疫检疫证书格式