鸡包涵体肝炎是一种由鸡包涵体病毒引起的急性传染病,主要通过消化道传播。该病在鸡群中易发生暴发,严重影响养殖业的发展。酶联免疫吸附试验是一种常用的检测方法,本标准旨在规范鸡包涵体肝炎酶联免疫吸附试验的操作流程,提高检测结果的准确性和可靠性。
1. 试验前准备
1.1 试剂准备
根据试剂说明书准备所需试剂,包括酶标板、酶标板稀释液、酶标板洗涤缓冲液、酶标板显色底物、酶标板停止液、阳性对照血清、阴性对照血清等。
1.2 样品准备
收集待检样品,如血清、血浆等,按照标准要求进行处理和保存。
1.3 试验环境准备
试验室应保持干净整洁,避免灰尘和异味干扰试验结果。试验室温度应控制在18℃~25℃,相对湿度应控制在40%~70%。
2. 试验操作
2.1 样品加样
将待检样品、阳性对照血清、阴性对照血清等加入酶标板中,按照试剂说明书的要求进行加样。
2.2 孵育
将酶标板密封,放入恒温箱中孵育,孵育时间和温度根据试剂说明书进行设置。
2.3 洗板
将酶标板洗涤缓冲液加入酶标板孔中,用洗板机进行洗板,洗板次数和洗板液的使用量根据试剂说明书进行设置。
2.4 加底物
将酶标板显色底物加入酶标板孔中,按照试剂说明书的要求进行加底物。
2.5 停止反应
将酶标板停止液加入酶标板孔中,按照试剂说明书的要求进行停止反应。
2.6 读板
用酶标仪对酶标板进行读板,记录各孔的吸光度值。
3. 结果判定
根据试剂说明书的要求,计算各样品的OD值,根据阳性对照血清和阴性对照血清的OD值,判断待检样品是否为阳性或阴性。
相关标准
GB/T 14937-2018 鸡包涵体肝炎病毒灭活疫苗
GB/T 14938-2018 鸡包涵体肝炎病毒减毒活疫苗
GB/T 14939-2018 鸡包涵体肝炎病毒血清学检测方法
GB/T 14940-2018 鸡包涵体肝炎病毒分离鉴定方法
GB/T 14941-2018 鸡包涵体肝炎病毒核酸检测方法