UDS试验是一种常用的体内细胞遗传毒性试验方法,可以评价化学物质对细胞DNA的损伤程度。本标准规定了UDS试验的方法和要求,主要包括以下内容:
1. 试验原理
UDS试验是通过测定哺乳动物肝细胞在DNA合成过程中的程序外DNA合成量来评价化学物质对细胞DNA的损伤程度。在正常情况下,哺乳动物肝细胞的DNA合成是有规律的,但当细胞受到化学物质的损伤时,DNA合成会出现异常,程序外DNA合成量也会增加。
2. 试验方法
UDS试验的具体方法包括以下步骤:
(1)制备肝细胞悬液:将小鼠或大鼠的肝脏取出,用胰酶和胆汁酸等消化酶制备肝细胞悬液。
(2)细胞培养:将肝细胞悬液接种到含有培养基和血清的培养皿中,进行细胞培养。
(3)化学物质处理:将待测化学物质加入培养皿中,使细胞受到化学物质的损伤。
(4)放射性核苷酸标记:将放射性核苷酸标记物加入培养皿中,使细胞进行DNA合成。
(5)细胞收集:用盐酸和EDTA等溶液收集细胞。
(6)放射性计数:用放射性计数器测定细胞中放射性核苷酸的计数值,计算程序外DNA合成量。
3. 试验结果的判定
UDS试验的结果通常用程序外DNA合成指数(UDSI)来表示,UDSI值越高,说明化学物质对细胞DNA的损伤程度越大。根据UDSI值的大小,可以将化学物质分为无毒、低毒、中毒和高毒四个等级。
4. 试验注意事项
UDS试验需要严格控制实验条件,避免外界因素对试验结果的影响。同时,还需要注意化学物质的浓度、处理时间和细胞的生长状态等因素,以保证试验结果的准确性和可靠性。
相关标准
GB/T 16483-2008 进出口危险化学品安全技术规范
GB/T 16484-2008 进出口危险化学品安全标志
GB/T 16485-2008 进出口危险化学品安全标签
GB/T 16486-2008 进出口危险化学品安全数据表
GB/T 16487-2008 进出口危险化学品安全运输指南