SN/T 2497.20-2010
进出口危险化学品安全试验方法 第20部分:Bradford法测定蛋白质含量
发布时间:2010-03-02 实施时间:2010-09-16


蛋白质是生物体内重要的有机物质,广泛存在于进出口危险化学品中。测定进出口危险化学品中蛋白质含量是保障产品质量和安全的重要手段。本标准采用Bradford法测定进出口危险化学品中蛋白质含量。

1.适用范围
本标准适用于进出口危险化学品中蛋白质含量的测定。

2.试验原理
Bradford法是一种常用的测定蛋白质含量的方法。该方法利用Coomassie Brilliant Blue G-250与蛋白质结合后的吸收光谱变化,通过比色法测定蛋白质含量。

3.试验仪器和试剂
3.1 试验仪器
- 分光光度计:可测量吸光度在400~750nm范围内的分光光度计。
- 恒温振荡器:可控制温度和振荡频率的恒温振荡器。

3.2 试剂
- Coomassie Brilliant Blue G-250:纯度为≥90%。
- 蛋白质标准品:如牛血清白蛋白等。
- 磷酸盐缓冲液:pH值为7.0。
- 甲醇:纯度为≥99.5%。
- 去离子水:用于制备试剂。

4.试验步骤
4.1 样品制备
将进出口危险化学品样品取适量,加入磷酸盐缓冲液,超声处理10分钟,离心沉淀,取上清液进行下一步操作。

4.2 制备标准曲线
取不同浓度的蛋白质标准品,加入Coomassie Brilliant Blue G-250和磷酸盐缓冲液,制备标准曲线。

4.3 测定样品蛋白质含量
将样品上清液加入Coomassie Brilliant Blue G-250和磷酸盐缓冲液,混匀后放置15分钟,测量吸光度值。

4.4 计算蛋白质含量
根据标准曲线计算样品中蛋白质含量。

5.结果计算与报告
根据试验结果计算样品中蛋白质含量,并填写试验报告。

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