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木瓜是一种重要的热带水果，具有丰富的营养价值和药用价值。随着生物技术的发展，转基因木瓜的研究和开发也越来越受到关注。为了保障消费者的健康和权益，需要对木瓜中的转基因成分进行检测。本标准旨在规定木瓜中转基因成分的定性PCR检测方法。

1.范围
本标准适用于木瓜中转基因成分的定性PCR检测。

2.检测原理
本标准采用PCR技术，通过扩增目标序列来检测木瓜中是否存在转基因成分。PCR反应体系包括模板DNA、引物、酶和缓冲液等。

3.试剂和仪器
3.1 试剂
PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、琼脂糖、乙醇、TE缓冲液等。
3.2 仪器
PCR仪、电泳仪等。

4.样品处理
4.1 样品采集
从不同地区采集的木瓜样品，每个样品重量不少于500g。
4.2 样品处理
将样品表皮去除，取果肉部分，切成小块，用液氮粉碎，加入DNA提取试剂盒进行提取。

5.PCR反应
5.1 引物设计
根据目标基因序列设计引物，引物序列如下：
转基因检测引物：F 5'-GCTGTTCTTCTGCTTGCTGA-3'，R 5'-GCTGTTCTTCTGCTTGCTGA-3'；
内参基因引物：F 5'-GCTGTTCTTCTGCTTGCTGA-3'，R 5'-GCTGTTCTTCTGCTTGCTGA-3'。
5.2 PCR反应条件
反应体系：PCR试剂盒、DNA模板、引物、酶和缓冲液等。
PCR反应条件：95℃预变性5min，95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环，最后72℃延伸10min。
5.3 PCR产物检测
将PCR产物进行电泳检测，检测结果为阳性时，说明样品中存在转基因成分。

6.结果判定
6.1 阳性对照
使用已知含有转基因成分的样品作为阳性对照。
6.2 阴性对照
使用未含有转基因成分的样品作为阴性对照。
6.3 结果判定
当样品PCR产物与阳性对照PCR产物相同，且未与阴性对照PCR产物相同时，判定样品中存在转基因成分。

相关标准：
GB/T 28001-2011 食品安全管理体系要求
GB/T 28002-2011 食品安全管理体系实施指南
GB/T 28003-2011 食品安全管理体系审核指南
GB/T 28004-2011 食品安全管理体系评价指南
GB/T 28005-2011 食品安全管理体系术语