SN/T 2300-2009
国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的检测方法
发布时间:2009-07-07 实施时间:2010-01-16
基孔肯雅病毒是一种由蚊子传播的病毒,可引起人类和动物的感染。在国境口岸,蚊类是基孔肯雅病毒传播的主要媒介之一。因此,对国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的检测具有重要意义。
本标准主要包括以下步骤:
1.采集蚊类样本
采集蚊类样本应选择在国境口岸附近的适宜地点进行,采集时间应在蚊类活动的高峰期。采集的蚊类样本应存放在干燥、阴凉、通风的地方,避免阳光直射和高温。
2.处理蚊类样本
将采集的蚊类样本进行分类、计数和鉴定,筛选出携带基孔肯雅病毒的蚊类样本。然后将蚊类样本进行消毒处理,避免污染和交叉感染。
3.提取病毒RNA
将处理后的蚊类样本进行病毒RNA提取,采用RNA提取试剂盒进行提取。提取后的RNA应存放在-80℃的冰箱中,避免反复冻融。
4.扩增病毒RNA
采用RT-PCR技术对提取的病毒RNA进行扩增,扩增条件应根据实验室的具体情况进行优化。扩增后的产物应进行凝胶电泳检测,确认扩增产物的大小和纯度。
5.检测扩增产物
采用基孔肯雅病毒特异性引物和探针进行检测,采用实时荧光定量PCR技术进行检测。检测结果应根据实验室的标准进行判定,确认是否存在基孔肯雅病毒。
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