牛病毒性腹泻-粘膜病（BVD-MD）是一种由黄病毒科病毒引起的牛类传染病，严重影响了畜牧业的发展。ELISA是一种常用的检测BVD-MD的方法，具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点，已成为BVD-MD诊断的重要手段。

试验原理：
本试验采用抗原捕获酶联免疫吸附法，利用特异性抗体对BVD-MD病毒抗原进行捕获，再加入酶标记的二抗进行检测，最后通过底物反应产生颜色反应，根据反应程度判断样品中是否存在BVD-MD病毒抗原。

试剂和设备：
本试验所需试剂和设备包括：BVD-MD病毒抗原检测试剂盒、微孔板、洗板液、稀释液、酶标记的二抗、底物、加样器、洗板器、显微镜等。

样品处理：
样品包括血清、血浆、组织等，应在4℃下保存，避免冻融。样品处理前应先离心去除杂质，然后进行适当稀释。

试验步骤：
1. 取出所需微孔板，标注样品编号。
2. 加入标准品和样品，分别加入对应的稀释液，混匀。
3. 加入BVD-MD病毒抗原检测试剂盒中的特异性抗体，孵育。
4. 加入酶标记的二抗，孵育。
5. 加入底物，孵育。
6. 加入停止液，测定吸光度值。
7. 根据吸光度值判断样品中是否存在BVD-MD病毒抗原。

结果判定：
根据试验结果，判断样品中是否存在BVD-MD病毒抗原。吸光度值高于阈值为阳性，低于阈值为阴性。

质量控制：
本试验应进行质量控制，包括阴性对照、阳性对照和中间对照。每次试验应加入对照样品，确保试验结果的准确性和可靠性。

相关标准
GB/T 22470-2008 动物病毒性疾病诊断试剂盒通用技术要求
GB/T 22471-2008 动物病毒性疾病诊断试剂盒检验规程
GB/T 22472-2008 动物病毒性疾病诊断试剂盒标签和说明书
GB/T 22473-2008 动物病毒性疾病诊断试剂盒质量控制
GB/T 22474-2008 动物病毒性疾病诊断试剂盒使用说明