松生枝干溃疡病是由松生枝干溃疡病菌引起的一种病害，主要危害松树。为了防止该病害的传播和扩散，需要对松生枝干溃疡病菌进行检疫鉴定。本标准就松生枝干溃疡病菌的检疫鉴定方法进行了规定。

1 生物学特性
松生枝干溃疡病菌是一种革兰氏阴性菌，属于杆菌科。该菌在营养琼脂平板上生长缓慢，需要7-10天才能形成菌落。菌落呈灰白色，表面光滑，边缘整齐。该菌在液体培养基中生长较快，可在24小时内形成浑浊液体。

2 分离鉴定
2.1 样品采集
从疑似感染松树的枝干、树皮或树叶上采集样品，将样品放入无菌袋中，尽快送至实验室进行处理。
2.2 分离培养
将样品在无菌条件下进行分离培养。将样品切碎后接种在营养琼脂平板上，培养温度为25-28℃，培养时间为7-10天。观察菌落形态和生长情况，进行初步鉴定。
2.3 鉴定确认
对初步鉴定为松生枝干溃疡病菌的菌株进行进一步鉴定确认。可采用生化试验、药敏试验等方法进行鉴定。

3 PCR检测
3.1 样品处理
将样品进行处理，提取样品中的DNA。
3.2 PCR反应
将提取的DNA进行PCR反应，使用特异性引物进行扩增。PCR反应条件为：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，共35个循环。PCR反应结束后，进行凝胶电泳分析。
3.3 结果判定
通过凝胶电泳分析，判断PCR扩增产物的大小和数量，确定是否存在松生枝干溃疡病菌。

相关标准
GB/T 19212.1-2017 植物检疫技术 植物病原菌检疫鉴定方法 第1部分：一般规定
GB/T 19212.2-2017 植物检疫技术 植物病原菌检疫鉴定方法 第2部分：细菌
GB/T 19212.3-2017 植物检疫技术 植物病原菌检疫鉴定方法 第3部分：真菌
GB/T 19212.4-2017 植物检疫技术 植物病原菌检疫鉴定方法 第4部分：病毒
GB/T 19212.5-2017 植物检疫技术 植物病原菌检疫鉴定方法 第5部分：线虫