1.范围
本标准适用于进出口染发剂中2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚的测定。

2.方法概述
样品经提取后，用高效液相色谱法分离，紫外检测器检测，外标法定量。

3.试剂和材料
3.1 2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚标准品
3.2 甲醇：色谱纯
3.3 乙腈：色谱纯
3.4 磷酸二氢钾：分析纯
3.5 磷酸氢二钠：分析纯
3.6 纯水：制备超纯水
3.7 氮气：纯度≥99.99%
3.8 乙酸乙酯：色谱纯

4.仪器
4.1 高效液相色谱仪
4.2 紫外检测器
4.3 称量器
4.4 超声波清洗器
4.5 氮气吹扫仪

5.样品的制备
5.1 取样
取样时应避免阳光直射和高温，避免样品受潮、变质。
5.2 样品的制备
将样品称取0.5g，加入50ml甲醇中，超声波清洗10min，过滤，取滤液10ml，加入10ml乙酸乙酯，振荡混合，离心分离，取上层液，用氮气吹干，加入1ml甲醇溶解，过滤，取滤液2ml，即可进入下一步操作。

6.操作步骤
6.1 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）
流动相：甲醇-水（70:30）
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
检测波长：254nm
进样量：20μl
6.2 标准曲线的绘制
取2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚标准品各5个不同浓度的溶液，分别加入甲醇中，制成标准曲线。
6.3 样品的测定
将样品溶液进样，按照标准曲线计算出样品中2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚的含量。

7.结果的计算
样品中2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚的含量，按照标准曲线计算。

8.精密度和准确度
8.1 精密度
在同一天内，重复测定6次，计算相对标准偏差（RSD），RSD不应大于5%。
8.2 准确度
加入已知量的2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚标准品，测定回收率，回收率应在95%~105%之间。

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