蓝舌病是一种由蓝舌病毒引起的急性传染病，主要危害反刍动物，如牛、羊等。琼脂免疫扩散试验是一种常用的蓝舌病诊断方法，本标准旨在规范该试验的操作流程，提高诊断准确性和可靠性。

1. 试验原理
琼脂免疫扩散试验是一种半定量的免疫学检测方法，利用琼脂凝胶中的抗原与抗体的特异性反应，形成免疫沉淀线，从而判断样品中是否存在蓝舌病毒抗体。

2. 试验操作
2.1 试验前准备
（1）准备琼脂凝胶板、抗原、抗体、标准品等试验用品。
（2）将琼脂凝胶板放置于4℃冰箱中保存，避免阳光直射和高温。
（3）将抗原、抗体、标准品等试验用品放置于2-8℃冰箱中保存，避免冻结。

2.2 试验操作步骤
（1）取出琼脂凝胶板，标记样品编号和试验日期。
（2）在琼脂凝胶板上打孔，每个孔直径为4mm，间距为5mm。
（3）将标准品、阳性对照、阴性对照和待测样品分别加入孔中。
（4）将琼脂凝胶板放置于湿度为80%、温度为25℃的恒温箱中，孵育24小时。
（5）观察琼脂凝胶板上是否出现免疫沉淀线，记录结果。

3. 试验结果判定
（1）阳性对照孔和标准品孔出现免疫沉淀线，阴性对照孔未出现免疫沉淀线，试验结果有效。
（2）阳性对照孔和标准品孔未出现免疫沉淀线，阴性对照孔出现免疫沉淀线，试验结果无效，需重新进行试验。

4. 试验报告
试验报告应包括样品编号、试验日期、试验结果等内容，并注明试验结果的判定标准和方法。

相关标准
GB/T 22470-2008 反刍动物蓝舌病病毒抗体检测方法
SN/T 1165.1-2002 蓝舌病酶联免疫吸附试验操作规程
SN/T 1165.3-2002 蓝舌病血清学试验操作规程
SN/T 1165.4-2002 蓝舌病病毒分离鉴定操作规程
SN/T 1165.5-2002 蓝舌病病毒核酸检测操作规程