SN/T 3566-2013
滤膜抽滤核酸提取方法
发布时间:2013-03-01 实施时间:2013-09-16


滤膜抽滤核酸提取方法是一种常用的实验室技术,用于从生物样品中提取核酸。本标准规定了滤膜抽滤核酸提取方法的要求、试验仪器和试剂、试验前的准备、试验步骤、结果计算和报告等内容,以确保提取到的核酸质量和纯度符合要求。

1. 要求
本标准适用于从各种生物样品中提取核酸,包括但不限于细胞、组织、血液、尿液、粪便等。提取的核酸应具有高纯度、高质量、高稳定性和高可靠性。

2. 试验仪器和试剂
试验仪器包括离心机、超声波细胞破碎仪、滤膜、pH计等。试剂包括蛋白酶K、异丙醇、EDTA、Tris-HCl缓冲液等。

3. 试验前的准备
在进行试验前,应对试验仪器和试剂进行检查和校准,确保其正常工作。同时,应准备好所需的生物样品,并进行必要的处理和保存。

4. 试验步骤
(1)细胞或组织样品的处理:将细胞或组织样品用PBS缓冲液洗涤,去除细胞外的杂质,然后用超声波细胞破碎仪破碎细胞或组织。
(2)核酸的提取:将破碎后的细胞或组织样品加入含有蛋白酶K的缓冲液中,经过一定时间的消化后,加入异丙醇,使核酸沉淀。然后将沉淀用乙醇洗涤,去除杂质,最后用TE缓冲液溶解核酸。
(3)滤膜抽滤:将溶解后的核酸样品加入滤膜中,通过滤膜抽滤,去除杂质和残留的蛋白酶K等物质,得到纯净的核酸样品。
(4)核酸的保存:将提取到的核酸样品保存在-20℃或更低的温度下,以保证其稳定性和可靠性。

5. 结果计算和报告
根据实验结果,计算核酸的浓度和纯度,并将结果记录在实验记录表中。同时,应对实验过程中的问题和异常情况进行记录和分析,并提出改进措施。

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