转基因技术是指将外源基因导入到目标生物体中,使其具有新的性状或功能。转基因技术的应用已经广泛,其中包括转基因马铃薯。转基因马铃薯是指在马铃薯中导入外源基因,使其具有抗虫、抗病、耐旱等性状。然而,转基因食品的安全性一直备受关注,因此需要对转基因成分进行检测。本标准规定了PCR和ELISA两种方法检测马铃薯中转基因成分的要求和方法。
1. 适用范围
本标准适用于检测马铃薯中转基因成分的PCR和ELISA方法。
2. 试验原理
2.1 PCR方法
PCR方法是通过扩增目标序列来检测马铃薯中转基因成分的方法。首先,提取马铃薯DNA,然后进行PCR扩增,最后通过凝胶电泳检测扩增产物。PCR方法的优点是灵敏度高、特异性好,但需要较高的实验技能和设备。
2.2 ELISA方法
ELISA方法是通过检测马铃薯中转基因蛋白质来检测转基因成分的方法。首先,将马铃薯样品加入到包含特异性抗体的孔中,然后加入酶标记的二抗,最后通过比色反应检测酶标记的二抗的信号。ELISA方法的优点是简单易行、操作简便,但灵敏度相对较低。
3. 试验步骤
3.1 PCR方法
3.1.1 样品制备
将马铃薯样品切碎,加入提取液中,进行DNA提取。
3.1.2 PCR扩增
将提取的DNA加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。
3.1.3 凝胶电泳检测
将PCR扩增产物进行凝胶电泳检测,判断是否存在目标序列。
3.2 ELISA方法
3.2.1 样品制备
将马铃薯样品切碎,加入提取液中,进行蛋白质提取。
3.2.2 ELISA检测
将提取的蛋白质加入到包含特异性抗体的孔中,加入酶标记的二抗,进行比色反应,判断是否存在目标蛋白质。
4. 结果判定
4.1 PCR方法
通过凝胶电泳检测PCR扩增产物,判断是否存在目标序列。如果存在目标序列,则判定为阳性;如果不存在目标序列,则判定为阴性。
4.2 ELISA方法
通过比色反应检测酶标记的二抗的信号,判断是否存在目标蛋白质。如果存在目标蛋白质,则判定为阳性;如果不存在目标蛋白质,则判定为阴性。
相关标准
GB/T 28046-2011 转基因生物检测方法
GB/T 28047-2011 转基因产品标识
GB/T 28048-2011 转基因生物质量安全评价
GB/T 28049-2011 转基因生物环境安全评价
GB/T 28050-2011 转基因生物风险评估