SN/T 2155-2008
建兰花叶病毒检测方法
发布时间:2008-09-04 实施时间:2009-03-16


建兰花叶病毒是一种常见的植物病毒,会导致建兰花的叶片出现黄化、变形等症状,严重影响建兰花的生长和品质。为了及时发现和控制建兰花叶病毒的传播,需要对建兰花进行病毒检测。本标准介绍了两种常用的建兰花叶病毒检测方法:ELISA和RT-PCR。

ELISA检测方法
ELISA是一种常用的免疫学检测方法,可以快速、准确地检测建兰花叶病毒。具体操作步骤如下:

1. 取建兰花叶片样品,将其磨成细碎的粉末。
2. 加入适量的提取液,混合均匀,放置一段时间。
3. 离心,取上清液。
4. 取一定量的上清液,加入包含建兰花叶病毒抗原的孔板中,孔板中的抗原会与样品中的病毒进行结合。
5. 加入特异性的抗体,与抗原结合形成复合物。
6. 加入酶标记的二抗,与复合物结合形成酶标记复合物。
7. 加入底物,酶标记复合物会催化底物发生反应,产生颜色。
8. 读取吸光度值,根据标准曲线计算出样品中建兰花叶病毒的含量。

RT-PCR检测方法
RT-PCR是一种基于聚合酶链式反应的检测方法,可以快速、高灵敏度地检测建兰花叶病毒。具体操作步骤如下:

1. 取建兰花叶片样品,将其磨成细碎的粉末。
2. 加入适量的提取液,混合均匀,放置一段时间。
3. 离心,取上清液。
4. 取一定量的上清液,加入RT-PCR反应体系中,包括引物、酶、核苷酸等。
5. 进行PCR扩增反应,扩增出建兰花叶病毒的特异性DNA片段。
6. 通过凝胶电泳等方法检测PCR产物,判断样品中是否存在建兰花叶病毒。

病毒鉴定
在进行建兰花叶病毒检测时,如果检测结果为阳性,需要进一步进行病毒鉴定,确定病毒的种类和亚型。常用的病毒鉴定方法包括序列分析、电镜观察等。

相关标准
GB/T 28469-2012 植物病毒检测方法
GB/T 28470-2012 植物病毒鉴定方法
GB/T 28471-2012 植物病毒检测质量控制方法
GB/T 28472-2012 植物病毒检测结果判定方法
GB/T 28473-2012 植物病毒检测报告编制方法