地中海实蝇是一种危害极大的农业害虫，其卵、幼虫和成虫均可危害水果、蔬菜等农作物，严重影响农业生产和国际贸易。为了防止地中海实蝇的传播和扩散，各国都采取了严格的检疫措施。本标准提供了一种可靠的检疫鉴定方法，即PCR法。

PCR法是一种基于DNA扩增的技术，可以快速、准确地检测出地中海实蝇的存在。具体操作步骤如下：

1. 样品处理：将待检样品（如水果、蔬菜等）取适量，经过粉碎、离心等处理，提取其中的DNA。

2. PCR扩增：将提取的DNA与特异性引物和酶混合，进行PCR扩增反应。PCR反应条件如下：预变性1个周期，94℃ 5min；变性1个周期，94℃ 30s；退火1个周期，55℃ 30s；延伸1个周期，72℃ 30s；最终延伸1个周期，72℃ 10min。反应结束后，将PCR产物进行电泳分析。

3. 结果判定：根据PCR产物的大小和电泳图谱，判断样品中是否存在地中海实蝇。

4. 质量控制：在每次PCR反应中，应设置阴性对照和阳性对照，以确保实验结果的准确性和可靠性。

本标准要求PCR法检测地中海实蝇的灵敏度应达到10^2个/克，特异性应达到100%。同时，还要求实验人员具备一定的PCR技术和实验操作经验，以确保实验结果的准确性和可靠性。

相关标准
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