SN/T 2482-2010
马铃薯丛枝植原体检疫鉴定方法
发布时间:2010-01-10 实施时间:2010-07-16


马铃薯丛枝植原体是一种病原体,能够引起马铃薯丛枝植原体病,对马铃薯生产造成严重危害。为了保障马铃薯生产的安全,需要对马铃薯进行丛枝植原体检疫鉴定。本标准旨在规范马铃薯丛枝植原体检疫鉴定方法,确保检测结果准确可靠。

1.范围
本标准适用于马铃薯丛枝植原体检疫鉴定。

2.样品采集
2.1 采样时间:在马铃薯生长期间,每个生长阶段各采集一次样品。
2.2 采样部位:采集马铃薯叶片、茎、根等部位。
2.3 采样方法:采用无菌器具采集样品,避免污染。

3.样品处理
3.1 样品处理前,将样品表面用70%乙醇消毒。
3.2 样品切碎,取适量样品进行处理。

4.DNA提取
4.1 样品处理后,将样品加入提取液中,进行DNA提取。
4.2 DNA提取后,进行纯化处理。

5.PCR扩增
5.1 选取适当的引物,进行PCR扩增。
5.2 PCR反应体系:模板DNA 1μl,引物1μl,dNTPs 1μl,Taq酶 0.2μl,10×PCR缓冲液 2.5μl,ddH2O 19.3μl。
5.3 PCR反应条件:95℃预变性5min,95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环。

6.PCR产物检测
6.1 将PCR产物进行电泳分析。
6.2 电泳条件:电压120V,电泳时间30min。
6.3 结果判定:根据PCR产物的大小和电泳图谱,判断是否存在马铃薯丛枝植原体。

相关标准
GB/T 19212.1-2011 马铃薯种薯检疫规程
GB/T 19212.2-2011 马铃薯种薯检疫方法
GB/T 19212.3-2011 马铃薯种薯检疫标准
GB/T 19212.4-2011 马铃薯种薯检疫报告
GB/T 19212.5-2011 马铃薯种薯检疫标志