SN/T 2627-2010
马铃薯卷叶病毒检疫鉴定方法
发布时间:2010-05-27 实施时间:2010-12-01
马铃薯卷叶病毒是一种重要的病毒性病害,能够引起马铃薯生长发育异常、减产甚至死亡。为了保障我国马铃薯生产的安全,需要对进口马铃薯进行卷叶病毒检疫。本标准规定了马铃薯卷叶病毒检疫鉴定方法,以确保进口马铃薯的安全性。
1.样品采集
样品采集应在马铃薯生长期间进行,采集样品应包括叶片、茎、根和块茎。样品应从疑似病株中采集,每个样品应包括不少于10个植株。采集的样品应立即送至实验室进行处理。
2.样品处理
样品处理应在无菌条件下进行。样品应先进行表面消毒,然后将样品切成小块,加入适量的PBS缓冲液中,进行离心沉淀。离心沉淀后,将上清液倒掉,留下沉淀物进行下一步操作。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA)
将样品沉淀物加入ELISA板中,加入特异性抗体,进行孵育和洗涤。然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗,进行孵育和洗涤。最后加入底物,进行反应。根据反应结果,判断样品是否含有卷叶病毒。
4.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)
将样品沉淀物进行RNA提取,然后进行逆转录反应,将RNA转化为cDNA。将cDNA加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。根据PCR扩增结果,判断样品是否含有卷叶病毒。
相关标准
GB/T 16180-2019 马铃薯种薯检疫规程
GB/T 16181-2019 马铃薯种薯检疫鉴定方法
GB/T 16182-2019 马铃薯普通种薯检疫规程
GB/T 16183-2019 马铃薯普通种薯检疫鉴定方法
GB/T 16184-2019 马铃薯种薯检疫标志