：
EV71病毒是一种肠道病毒，可引起手足口病、脑炎等疾病。近年来，随着全球旅游业的发展，EV71病毒在国际间的传播日益频繁，成为国际公共卫生领域的重要问题。为了保障国境口岸的公共卫生安全，需要对进出境人员、物品、动植物等进行EV71病毒检测。本标准旨在规范国境口岸EV71病毒实时荧光RT-PCR检测方法，确保检测结果准确可靠。

1.范围
本标准适用于国境口岸对进出境人员、物品、动植物等进行EV71病毒检测。

2.引用文件
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质规格和检验方法
GB/T 14233.2-2005 检验检疫实验室技术规范 第2部分：检验检疫实验室质量体系
GB/T 19489-2004 分子生物学实验室安全规范
GB/T 21415-2008 分子生物学实验室质量控制指南
GB/T 27930-2015 分子生物学实验室技术规范

3.术语和定义
3.1 EV71病毒
肠道病毒71型，英文名称Enterovirus 71，简称EV71，是一种单股正链RNA病毒，属于肠道病毒属。

3.2 实时荧光RT-PCR
实时荧光定量PCR技术，英文名称Real-time fluorescent quantitative PCR，简称RT-qPCR，是一种基于PCR技术的分子生物学检测方法，可以实现对DNA或RNA的定量检测。

4.检测方法
4.1 样品采集
样品采集应按照GB/T 14233.2-2005的规定进行，采集的样品应符合GB/T 6682-2008的水质规格。

4.2 样品处理
样品处理应按照GB/T 19489-2004的规定进行，避免污染和交叉感染。

4.3 实时荧光RT-PCR检测
实时荧光RT-PCR检测应按照GB/T 21415-2008和GB/T 27930-2015的规定进行，检测结果应符合GB/T 14233.2-2005的规定。

5.结果判定
5.1 阳性判定
当样品的荧光信号值超过阈值时，判定为阳性。

5.2 阴性判定
当样品的荧光信号值未超过阈值时，判定为阴性。

6.质量控制
6.1 内部质量控制
应按照GB/T 21415-2008的规定进行内部质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。

6.2 外部质量控制
应参加国家或地方质量控制项目，定期进行外部质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。

相关标准：
GB/T 14233.2-2005 检验检疫实验室技术规范 第2部分：检验检疫实验室质量体系
GB/T 19489-2004 分子生物学实验室安全规范
GB/T 21415-2008 分子生物学实验室质量控制指南
GB/T 27930-2015 分子生物学实验室技术规范
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质规格和检验方法