油菜茎基溃疡病菌是一种危害油菜作物的病原菌,能够引起油菜茎基部的溃疡病变,严重影响油菜的产量和品质。为了保障油菜生产的安全和质量,需要对油菜茎基溃疡病菌进行检疫鉴定。本标准就是为了规范油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定方法而制定的。
1 范围
本标准适用于油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定。
2 样品采集
2.1 样品采集时间
油菜茎基溃疡病菌的病原体主要存在于油菜茎基部的病变组织中,因此样品采集应在油菜茎基部出现病变时进行。
2.2 样品采集方法
采用无菌剪刀或刀片将病变组织剪下,放入无菌离心管中,密封好标签,注明采样时间、地点、样品编号等信息。
3 样品处理
3.1 样品消毒
将采集的样品在无菌条件下进行消毒处理,消毒液的浓度为0.1%的次氯酸钠溶液,浸泡5分钟后用无菌蒸馏水冲洗3次,去除消毒液残留。
3.2 样品分离
将样品在无菌条件下进行分离处理,取适量样品,用无菌剪刀或刀片将病变组织切碎,加入无菌离心管中,加入适量的生理盐水,振荡均匀后进行稀释,取适量的稀释液接种到含有适宜培养基的无菌平板上,进行培养。
4 鉴定
4.1 形态学鉴定
在培养基上观察菌落形态、大小、颜色等特征,观察菌体形态、大小、颜色等特征,进行初步鉴定。
4.2 生理生化鉴定
进行革兰染色、氧化酶试验、嗜热反应试验、葡萄糖发酵试验等生理生化鉴定,进一步确定菌株种类。
4.3 分子生物学鉴定
采用PCR技术进行分子生物学鉴定,确定菌株种类。
相关标准
GB/T 23538-2009 油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定方法
GB/T 23539-2009 油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定技术规范
GB/T 23540-2009 油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定质量控制规范
GB/T 23541-2009 油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定结果判定规范
GB/T 23542-2009 油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定报告编制规范