黑头长翅卷蛾（Grapholita molesta Busck）是一种重要的果树害虫，对桃、李、苹果、梨等果树造成严重危害。为了防止黑头长翅卷蛾的传播和危害，需要对其进行检疫鉴定。本标准就是为了规范黑头长翅卷蛾的检疫鉴定方法而制定的。

1.范围
本标准适用于黑头长翅卷蛾的检疫鉴定。

2.样品采集
2.1 样品采集时间
黑头长翅卷蛾的成虫在每年的4月至10月出现，因此样品采集时间应在这个时间段内进行。
2.2 样品采集方法
样品采集应选择果实、果树枝条、树皮等可能寄生黑头长翅卷蛾的部位进行。采集时应注意不损伤样品，避免影响后续的检疫鉴定工作。

3.标本制备
3.1 标本保存
采集到的样品应立即送至实验室进行处理。如果不能立即处理，应将样品放入密闭袋中，避免样品受到外界干扰。
3.2 标本制备方法
将采集到的样品进行处理，取出黑头长翅卷蛾成虫或幼虫，进行形态鉴定或分子鉴定。

4.形态鉴定
4.1 形态特征
黑头长翅卷蛾成虫体长约8mm，翅展开宽度约15mm，前翅呈灰褐色，有黑色斑点，后翅呈灰白色。幼虫体长约10mm，呈白色，头部呈黑色。
4.2 形态鉴定方法
将标本放在显微镜下进行观察，根据形态特征进行鉴定。

5.分子鉴定
5.1 分子鉴定方法
采用PCR扩增黑头长翅卷蛾的COI基因序列，进行序列比对和系统发育分析，确定黑头长翅卷蛾的物种鉴定。
5.2 PCR扩增条件
反应体系：2×PCR Master Mix 12.5μl，模板DNA 1μl，COI引物（10μM）1μl，ddH2O 10.5μl。
PCR程序：95℃ 5min，95℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 1min，共35个循环，72℃ 10min，4℃保存。

相关标准
GB/T 19212.1-2017 植物检疫技术术语 第1部分：总则
GB/T 19212.2-2017 植物检疫技术术语 第2部分：检疫生物学
GB/T 19212.3-2017 植物检疫技术术语 第3部分：检疫处理
GB/T 19212.4-2017 植物检疫技术术语 第4部分：检疫检测
GB/T 19212.5-2017 植物检疫技术术语 第5部分：检疫证书