SN/T 3683-2013
松针褐枯病菌检疫鉴定方法
发布时间:2013-08-30 实施时间:2014-03-01
松针褐枯病菌是一种危害松树的真菌,能够引起松树的枯死。为了防止松针褐枯病菌的传播和危害,需要对其进行检疫鉴定。本标准规定了松针褐枯病菌检疫鉴定方法,具体内容如下:
1. 样品采集
样品应在松树枯死或患病的地方采集,采集时应选择病变部位,避免选择健康部位。样品应尽快送至实验室进行处理。
2. 分离
将样品表面用70%的酒精消毒,然后用消毒的剪刀将样品切成小块,放入含有1%的次氯酸钠的烧杯中,用铁丝将样品压碎,使其均匀分散。然后将样品涂抹在含有1%的次氯酸钠的琼脂平板上,放置在28℃的恒温箱中培养3-5天,直到出现菌落。
3. 培养
将分离出的菌落接种到含有20%的人血清的琼脂平板上,放置在28℃的恒温箱中培养3-5天,直到出现菌落。
4. 鉴定
将培养好的菌落取出,进行形态学鉴定。松针褐枯病菌的菌落呈灰色或棕色,表面有细毛,菌落边缘呈波浪状。显微镜下观察,松针褐枯病菌的孢子呈椭圆形或卵圆形,大小为5-8微米,有一定的透明度。
5. 检测
将鉴定好的松针褐枯病菌进行检测。常用的检测方法有PCR检测和ELISA检测。其中,PCR检测是通过扩增松针褐枯病菌的DNA来进行检测,具有高灵敏度和高特异性;ELISA检测是通过检测松针褐枯病菌的抗原来进行检测,具有快速、简便的特点。
相关标准
GB/T 19212-2016 森林有害生物检疫技术规范
GB/T 19213-2016 森林有害生物检疫技术术语
GB/T 19214-2016 森林有害生物检疫技术检测方法
GB/T 19215-2016 森林有害生物检疫技术检疫处理
GB/T 19216-2016 森林有害生物检疫技术检疫证书