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燕窝是一种珍贵的食品，其主要成分是唾液酸。唾液酸是一种多糖，具有多种生物学功能，如细胞识别、细胞黏附、细胞信号转导等。因此，唾液酸含量是燕窝质量的重要指标之一。本标准规定了出口燕窝及其制品中唾液酸的测定方法。

1.范围
本标准适用于出口燕窝及其制品中唾液酸的测定。

2.原理
将燕窝或其制品样品加入酸性溶液中，使唾液酸与酸性溶液中的二苯基胺反应生成紫色化合物，用分光光度计测定其吸光度，根据标准曲线计算唾液酸含量。

3.试剂和材料
3.1 二苯基胺：纯度不低于99%。
3.2 硫酸：纯度不低于98%。
3.3 硫酸钠：纯度不低于99%。
3.4 硫酸铜：纯度不低于99%。
3.5 硫酸铵：纯度不低于99%。
3.6 氯仿：纯度不低于99%。
3.7 甲醇：纯度不低于99%。
3.8 水：去离子水或蒸馏水。
3.9 标准品：唾液酸标准品。

4.仪器
4.1 分光光度计：波长范围为190~900nm，分辨率为1nm。
4.2 电子天平：分辨率为0.1mg。

5.样品的制备
5.1 燕窝样品：取适量燕窝样品，用水浸泡至软化，去除杂质，晾干备用。
5.2 燕窝制品样品：取适量燕窝制品样品，粉碎，过筛，取适量样品，晾干备用。

6.操作步骤
6.1 标准曲线的制备
6.1.1 取唾液酸标准品0.1g，加入100ml水中，摇匀，称取10ml，加入50ml硫酸铜溶液中，加热至沸腾，冷却至室温，用氯仿萃取，取有机相10ml，加入10ml甲醇中，摇匀，称取1ml，加入10ml水中，摇匀，即得唾液酸标准溶液。
6.1.2 取唾液酸标准溶液，分别加入不同容量的水中，制备不同浓度的标准溶液，浓度范围为0~100μg/ml。
6.1.3 用分光光度计测定各标准溶液的吸光度，绘制标准曲线。

6.2 样品的测定
6.2.1 取适量燕窝或其制品样品，加入50ml硫酸铜溶液中，加热至沸腾，冷却至室温，用氯仿萃取，取有机相10ml，加入10ml甲醇中，摇匀，称取1ml，加入10ml水中，摇匀，用分光光度计测定其吸光度。
6.2.2 根据标准曲线计算唾液酸含量。

7.结果的计算与表示
7.1 计算公式
唾液酸含量（μg/g）=（C×V×1000）/m
其中，C为样品的唾液酸浓度（μg/ml），V为样品的萃取液体积（ml），m为样品的质量（g）。
7.2 结果的表示
结果保留两位小数，单位为μg/g。

8.精密度和准确度
8.1 精密度
在同一实验室内，重复测定6次同一样品，计算相对标准偏差（RSD），RSD不应大于5%。
8.2 准确度
将已知浓度的唾液酸标准品加入样品中，测定其回收率，回收率应在95%~105%之间。

9.质量控制
9.1 仪器的校准
每天使用前，应对分光光度计进行校准。
9.2 样品的处理
样品的处理应在同一实验室内进行，避免不必要的误差。
9.3 试剂的质量控制
试剂的质量应符合标准要求，使用前应进行检查。

相关标准：
GB/T 5009.3-2016 食品中唾液酸的测定
GB/T 5009.8-2016 食品中糖的测定
GB/T 5009.9-2016 食品中蛋白质的测定
GB/T 5009.10-2016 食品中脂肪的测定
GB/T 5009.11-2016 食品中灰分的测定