SN/T 3327-2012
猪瘟病毒逆转录环介导等温核酸扩增检测方法
发布时间:2012-12-12 实施时间:2013-07-01
猪瘟病毒是一种高度传染性病毒,能够引起猪的严重疾病,对养猪业造成了很大的经济损失。因此,对猪瘟病毒的检测非常重要。本标准提供了一种逆转录环介导等温核酸扩增检测方法,可以快速、准确地检测猪瘟病毒。
本标准适用于猪瘟病毒的检测,包括病毒的分离、提取、逆转录、等温核酸扩增和结果判定等步骤。其中,逆转录和等温核酸扩增是本方法的核心步骤。
逆转录是将RNA转录成cDNA的过程,本标准使用的是逆转录酶RTase H-,可以在较低的温度下进行反应,避免了RNA的降解和cDNA的二次结构的形成。等温核酸扩增是在等温条件下进行的核酸扩增,不需要复杂的温度控制设备,可以在简单的实验室条件下进行。
本标准要求使用特定的引物和探针进行等温核酸扩增,可以选择荧光探针或者结构探针。荧光探针可以实现实时监测扩增过程,结构探针则可以在扩增结束后进行结果判定。
本标准要求对样品进行分离和提取,可以使用商业化的分离和提取试剂盒,也可以使用自制的方法。在逆转录和等温核酸扩增过程中,要求使用无菌技术,避免污染。
本标准要求对结果进行判定,可以根据荧光信号或者结构探针的信号进行判定。同时,要求进行阳性对照和阴性对照,确保结果的准确性。
相关标准
GB/T 22470-2008 猪瘟病毒检验方法
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GB/T 22472-2008 猪瘟病毒活疫苗检验方法
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