SN/T 2600-2010
出境水杉遗传种质资源快速鉴定方法
发布时间:2010-05-27 实施时间:2010-12-01


出境水杉是我国珍稀濒危树种之一,具有重要的生态和经济价值。为了保护和利用好出境水杉遗传种质资源,需要对其进行鉴定和鉴别。本标准提供了一种快速鉴定方法,可以准确地鉴定出境水杉遗传种质资源。

1. 样品的采集和保存
样品采集应选择健康、生长良好的树木,采集的样品应包括叶片、嫩枝、花、果实等。采集后应立即将样品放入干燥的密闭袋中,避免阳光直射和高温。样品应尽快送至实验室进行处理。

2. DNA提取
将样品取出后,使用DNA提取试剂盒进行DNA提取。提取后的DNA应进行质量检测,确保DNA质量符合要求。

3. PCR扩增
使用特异性引物对DNA进行PCR扩增。PCR反应体系和程序如下:

反应体系:
模板DNA 1 μL
10×PCR缓冲液 2.5 μL
2.5 mM dNTPs混合液 0.5 μL
10 μM引物1 0.5 μL
10 μM引物2 0.5 μL
Taq DNA聚合酶 0.2 μL
ddH2O 20.3 μL

PCR程序:
预变性 94℃ 5 min
变性 94℃ 30 s
退火 55℃ 30 s
延伸 72℃ 30 s
循环30次
最终延伸 72℃ 10 min
保温 4℃

4. 电泳分析
将PCR产物进行电泳分析,分析结果应与已知的出境水杉DNA条形码进行比对,确定样品的鉴定结果。

相关标准
GB/T 19423-2004 植物遗传资源采集、保存和管理规范
GB/T 19424-2004 植物遗传资源DNA条形码技术规范
GB/T 19425-2004 植物遗传资源DNA指纹图谱技术规范
GB/T 19426-2004 植物遗传资源DNA序列分析技术规范
GB/T 19427-2004 植物遗传资源DNA多态性分析技术规范