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大豆疫霉病是由大豆疫霉菌引起的一种病害，严重影响大豆的产量和质量。因此，对大豆疫霉病菌的检测具有重要意义。本标准采用实时荧光PCR技术，能够快速、准确地检测大豆疫霉病菌。

1.范围
本标准适用于大豆种子、大豆油、大豆饼粕等样品中大豆疫霉病菌的检测。

2.引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价（ISO 3696:1987，MOD）
GB/T 191-2008 包装通用术语
GB/T 6688-2008 分析化学实验室技术要求和评价准则
GB/T 21415.1-2008 分子生物学实验室通用技术要求和评价 第1部分：基本要求和考虑事项
GB/T 21415.2-2008 分子生物学实验室通用技术要求和评价 第2部分：实时荧光定量PCR技术

3.原理
本标准采用实时荧光PCR技术，利用特异性引物和探针扩增和检测大豆疫霉病菌的DNA序列。通过荧光信号的变化，可以实现对大豆疫霉病菌的定量检测。

4.试剂和材料
4.1 试剂
4.1.1 DNA提取试剂盒
4.1.2 实时荧光PCR试剂盒
4.1.3 大豆疫霉病菌DNA标准品
4.2 材料
4.2.1 离心管
4.2.2 PCR管
4.2.3 稀释板
4.2.4 实时荧光PCR仪

5.仪器
5.1 实时荧光PCR仪
5.2 离心机
5.3 恒温水浴器
5.4 电子天平

6.操作步骤
6.1 样品处理
6.2 DNA提取
6.3 PCR扩增
6.4 数据分析

7.结果判定
7.1 阳性判定
7.2 阴性判定

8.检测限
8.1 大豆种子：10 CFU/g
8.2 大豆油：10 CFU/mL
8.3 大豆饼粕：10 CFU/g

9.精密度和重复性
9.1 精密度
9.2 重复性

10.其他要求
10.1 实验室环境
10.2 实验人员
10.3 质量控制

相关标准：
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价（ISO 3696:1987，MOD）
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GB/T 21415.2-2008 分子生物学实验室通用技术要求和评价 第2部分：实时荧光定量PCR技术