黄鱼是一种常见的海水鱼类,因其肉质鲜美,营养丰富,深受消费者喜爱。然而,市场上也存在着一些假冒伪劣的黄鱼制品,这些制品可能是由其他鱼类制成的,或者是添加了黄鱼的成分。为了保障消费者的权益,需要对黄鱼制品进行鉴别和检测。
本标准提供了一种实时荧光PCR法,用于检测黄鱼制品中的黄鱼成分。该方法基于PCR技术,通过特异性引物和探针扩增和检测黄鱼DNA序列,从而实现对黄鱼成分的检测和鉴别。
具体操作步骤如下:
1. 样品制备:将黄鱼制品样品取出,去除骨头和皮肉,然后将样品切成小块,加入适量的PBS缓冲液,混匀后离心,取上清液备用。
2. DNA提取:使用商用DNA提取试剂盒,按照说明书的要求提取样品中的DNA。
3. PCR扩增:将提取的DNA加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。PCR反应体系包括PCR引物、探针、TaqMan PCR Master Mix等。PCR反应条件为:95℃预变性5min,95℃变性15s,60℃退火1min,共40个循环。
4. 实时荧光检测:在PCR扩增过程中,使用实时荧光PCR仪检测PCR产物的荧光信号。根据荧光信号的强度和曲线形状,判断样品中是否存在黄鱼成分。
本标准要求,实时荧光PCR法检测黄鱼成分的灵敏度应达到0.1%。同时,为了保证检测结果的准确性和可靠性,需要进行负对照和阳性对照实验,以及重复性和稳定性实验。
相关标准
GB/T 5009.124-2017 食品中蛋白质的测定 氮元素测定法
GB/T 5009.156-2017 食品中脂肪的测定 光度法
GB/T 5009.229-2017 食品中灰分的测定
GB/T 5009.268-2017 食品中钠的测定 火焰光度法
GB/T 5009.268-2017 食品中钙、铁、锌、铜、锰的测定 原子吸收光谱法