马铃薯是我国重要的经济作物之一,但由于其易感性和广泛种植,常常受到各种病害的威胁。其中,皮斑病是一种严重的病害,能够导致马铃薯产量大幅度下降。为了保障马铃薯生产的安全和质量,需要对马铃薯皮斑病菌进行检疫鉴定。本标准就是为了规范马铃薯皮斑病菌检疫鉴定方法而制定的。
1 范围
本标准适用于马铃薯皮斑病菌的检疫鉴定。
2 规定
2.1 样品采集
2.1.1 采样时间:在马铃薯生长期间,发现疑似皮斑病的病株,应立即采集样品。
2.1.2 采样方法:采用无菌铁针或无菌铁锤,在病株上取样,每个样品应包括病斑、健康组织和土壤。
2.1.3 样品数量:每个样品应采集3个,分别来自不同的病株。
2.2 样品处理
2.2.1 样品运输:采集后,应立即将样品送至实验室进行处理。
2.2.2 样品处理:将样品表面用70%的酒精消毒,然后用无菌剪刀将病斑和健康组织分别剪下,分别放入无菌离心管中,加入适量的生理盐水,制成悬浮液。
2.3 菌落分离
2.3.1 培养基:采用马铃薯蔗糖琼脂培养基。
2.3.2 培养条件:在28℃下,光照强度为3000lx的条件下培养。
2.3.3 分离方法:将样品悬浮液均匀涂布在马铃薯蔗糖琼脂培养基上,培养3-5天,观察菌落形态和生长情况。
2.4 鉴定
2.4.1 形态学鉴定:观察菌落形态、大小、颜色等特征。
2.4.2 生理生化鉴定:进行氧化酶、过氧化氢酶、卟啉酶等生理生化试验。
2.4.3 分子生物学鉴定:采用PCR技术进行鉴定。
相关标准
GB/T 16180-2019 马铃薯种薯检疫规程
GB/T 16181-2019 马铃薯种薯检疫鉴定方法
GB/T 16182-2019 马铃薯普通种薯检疫规程
GB/T 16183-2019 马铃薯普通种薯检疫鉴定方法
GB/T 16184-2019 马铃薯种薯检疫标志