番茄严重曲叶病毒是一种重要的植物病毒，能够感染多种作物，如番茄、辣椒、茄子等。该病毒的感染会导致植株生长不良、叶片变形、果实畸形等症状，严重影响作物产量和品质。为了防止该病毒的传播和扩散，需要对植物进行检疫鉴定。本标准规定了番茄严重曲叶病毒的检疫鉴定方法，包括PCR和ELISA两种方法。

1. PCR检测法
PCR检测法是一种基于病毒核酸的检测方法，具有高灵敏度和特异性。该方法需要提取植物样品中的病毒RNA或DNA，然后进行PCR扩增和检测。具体操作步骤如下：

（1）样品处理：将植物样品切碎，加入提取液中，经过离心、洗涤等步骤，提取样品中的病毒RNA或DNA。

（2）PCR扩增：将提取的RNA或DNA作为模板，进行PCR扩增。PCR反应体系包括PCR缓冲液、引物、酶等。

（3）检测结果分析：将PCR扩增产物进行凝胶电泳，观察扩增产物的大小和数量，判断样品中是否存在番茄严重曲叶病毒。

2. ELISA检测法
ELISA检测法是一种基于病毒抗原的检测方法，具有快速、简便、经济的优点。该方法需要将植物样品中的病毒抗原与特异性抗体结合，然后进行酶标记和检测。具体操作步骤如下：

（1）样品处理：将植物样品切碎，加入提取液中，经过离心、洗涤等步骤，提取样品中的病毒抗原。

（2）抗原结合：将提取的病毒抗原与特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。

（3）酶标记：将抗原-抗体复合物与酶标记抗体结合，形成酶标记复合物。

（4）检测结果分析：将酶标记复合物与底物反应，产生颜色变化，根据颜色变化程度判断样品中是否存在番茄严重曲叶病毒。

相关标准
GB/T 19212.21-2017 植物检疫技术 番茄严重曲叶病毒检疫鉴定方法
GB/T 19212.22-2017 植物检疫技术 番茄花叶病毒检疫鉴定方法
GB/T 19212.23-2017 植物检疫技术 番茄斑点萎凋病毒检疫鉴定方法
GB/T 19212.24-2017 植物检疫技术 番茄黄化曲叶病毒检疫鉴定方法
GB/T 19212.25-2017 植物检疫技术 番茄花叶病毒检疫鉴定方法