SN/T 3963-2014
桃丛簇花叶病毒检测方法
发布时间:2014-04-09 实施时间:2014-11-01


桃丛簇花叶病毒是一种常见的果树病毒,会导致桃树、杏树、樱桃树等果树的叶片出现黄化、病斑等症状,严重影响果树的生长和产量。因此,对桃丛簇花叶病毒的检测非常重要。

本标准规定了两种桃丛簇花叶病毒检测方法:RT-PCR和ELISA。其中,RT-PCR是一种基于PCR技术的检测方法,可以快速、准确地检测出桃丛簇花叶病毒的存在;ELISA则是一种基于抗体与抗原反应的检测方法,可以通过检测样品中的病毒抗原来判断样品中是否存在桃丛簇花叶病毒。

具体操作步骤如下:

1. RT-PCR检测方法

(1)提取样品中的总RNA,并进行逆转录反应,得到cDNA。

(2)将cDNA用作PCR反应的模板,进行PCR扩增。

(3)将PCR产物进行凝胶电泳,观察PCR产物的大小和数量。

(4)将PCR产物进行测序,确认PCR产物的序列是否与桃丛簇花叶病毒的序列匹配。

2. ELISA检测方法

(1)将样品加入包含桃丛簇花叶病毒抗体的孔板中,使样品中的病毒抗原与抗体结合。

(2)加入辣根过氧化物酶标记的二抗,使其与孔板中的抗体结合。

(3)加入底物,使底物与辣根过氧化物酶结合,产生颜色反应。

(4)通过比较样品的OD值和对照的OD值,判断样品中是否存在桃丛簇花叶病毒。

相关标准
GB/T 28496-2012 植物病毒检疫技术术语
GB/T 28497-2012 植物病毒检疫技术通则
GB/T 28498-2012 植物病毒检疫技术检测方法
GB/T 28499-2012 植物病毒检疫技术检测设备
GB/T 28500-2012 植物病毒检疫技术检测质量控制