菌落总数是微生物检验中的一个重要指标，它反映了食品中微生物的总体数量。本标准适用于进出口食品中菌落总数的计数方法。

1.范围
本标准适用于进出口食品中菌落总数的计数方法。

2.引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 4789.2-2016 食品微生物学检验 第2部分：肠道致病菌检验
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 第3部分：耐热芽孢杆菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 第4部分：大肠杆菌检验
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 第5部分：金黄色葡萄球菌检验

3.定义
3.1 菌落总数
指在一定条件下，菌落形成的数量。

4.原理
将食品样品制成适当的稀释液，取适量涂布于含有适宜营养物质的琼脂平板上，经过一定时间的培养后，计算菌落总数。

5.仪器和设备
5.1 培养箱
5.2 称量器
5.3 灭菌器
5.4 琼脂平板
5.5 移液器
5.6 恒温水浴器

6.试剂和材料
6.1 无菌蒸馏水
6.2 琼脂培养基
6.3 无菌玻璃棒
6.4 无菌容器

7.样品处理
7.1 样品的制备
将样品称取适量，加入适量的无菌蒸馏水，混合均匀，制成适当的稀释液。
7.2 稀释液的制备
将样品制成的稀释液，再取适量加入无菌蒸馏水，制成适当的稀释液。

8.操作步骤
8.1 准备琼脂平板
将琼脂培养基加热至完全溶解，冷却至50℃左右，倒入无菌平板中，使其均匀分布，冷却凝固。
8.2 取样
取适量的稀释液，用移液器滴于琼脂平板上，使其均匀分布。
8.3 培养
将琼脂平板放入培养箱中，按照相应的温度和时间进行培养。
8.4 计数
在菌落形成后，用无菌玻璃棒在琼脂平板上进行计数。

9.计算
计算公式：N = (n1 + n2 + … + nk) / V
其中，N为菌落总数，n1、n2、…、nk为各平板上的菌落数，V为取样量。

10.结果表示
结果应以CFU/g或CFU/mL表示。

11.质量控制
11.1 重复性
同一样品在同一实验室内，应重复进行3次试验，其菌落总数的相对标准偏差不应大于10%。
11.2 平行试验
同一样品在同一实验室内，应进行平行试验，其菌落总数的相对标准偏差不应大于10%。
11.3 对照试验
应设置对照试验，以保证试验的准确性和可靠性。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 4789.2-2016 食品微生物学检验 第2部分：肠道致病菌检验
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 第3部分：耐热芽孢杆菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 第4部分：大肠杆菌检验
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 第5部分：金黄色葡萄球菌检验