实时PCR技术是一种快速、灵敏、特异、可靠的检测方法，已广泛应用于食品安全领域。本标准旨在规范实时PCR检测食源性病原微生物的方法，确保检测结果准确可靠。

1.样品处理
样品处理应根据不同的样品类型进行选择，确保样品中的病原微生物能够被有效提取。样品处理过程中应注意避免污染和交叉污染。

2.核酸提取
核酸提取应选择适当的方法，确保提取的核酸质量和纯度满足实时PCR检测的要求。核酸提取过程中应注意避免污染和交叉污染。

3.实时PCR反应体系
实时PCR反应体系应包括引物、探针、酶、缓冲液等组成部分。引物和探针的设计应符合实时PCR技术的要求，确保检测的特异性和灵敏度。酶和缓冲液的选择应根据实验室的实际情况进行选择。

4.实时PCR反应条件
实时PCR反应条件应根据不同的病原微生物和实验室的实际情况进行优化。反应条件包括反应温度、反应时间、荧光信号采集时间等。

5.结果判定
实时PCR检测结果应根据实验室的标准操作程序进行判定。结果应根据荧光信号的阈值周期数（Ct值）进行判定，同时应注意防止假阳性和假阴性结果的出现。

相关标准
GB/T 4789.2-2016 食品微生物学检验 第2部分：肠道致病菌检验
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 第3部分：耐热性芽孢杆菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 第4部分：金黄色葡萄球菌检验
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 第5部分：大肠杆菌检验
GB/T 4789.10-2016 食品微生物学检验 第10部分：沙门氏菌检验